均质型免洗Lumit Insulin检测胰岛素释放实验GSIS

Lumit® Insulin检测法是一种均质型免洗方法，用于高效检测葡萄糖刺激胰岛素分泌（GSIS）实验。相比传统ELISA或RIA，它操作简单、仅需70分钟，且灵敏度高、线性范围广（~10pM至8nM）。该方法适用于细胞系和人胰岛微组织模型，所需样品少，可在384孔板中高通量检测大量样本（如灌注实验），并兼容半自动化分液。核心优势在于大幅简化流程，使研究者能当日完成实验并分析数据，加速糖尿病研究。

Lumit® Insulin用于检测胰岛素释放实验(GSIS)

均质型胰岛素检测

免洗、快速

葡萄糖、脂质、蛋白质和氨基酸代谢之间的相互作用是复杂的，必须根据环境的变化进行精细的调节。胰岛素和胰高血糖素等激素在细胞、器官以及整个有机体水平的内环境联系和协调代谢途径方面起着核心作用。

传统的ELISA（酶联免疫吸附法）或RIA（放射免疫法）检测需要许多操作步骤，因此检测胰腺细胞或胰岛分泌的胰岛素和胰高血糖素被认为是一项繁重的工作。均质的免疫检测方法减少了所需操作的步骤，并且可扩展到检测大量数据点，例如来自灌注实验的数百或数千个样本。

使用均质型Lumit® Insulin和Lumit® Glucagon 检测法，您可以在早上进行高通量的葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)实验，并在下午分析胰岛素和胰高血糖素分泌的数据，使您快速做出实验决策，加速推进糖尿病研究。

产品优势

用于细胞系和人胰岛微组织模型系统GSIS检测；
所需样品少，可在384孔板中检测，可对大量样品的快速测量，例如进行灌注或筛选实验；
基于萤光素酶互补系统NanoBiT®技术，生物发光均质法，灵敏度高，线性范围大；

操作简单，无需洗涤，70分钟即可完成。

_	Insulin	Glucagon
线性范围	~10pM to 8nM	~1pM to 1-2 nM
最大S/B	~500	~500
L.O.D (at S/N = 3)	~ 10pM (58 pg/ml)	~1pM (3.4 pg/ml)

GSIS葡萄糖刺激的

胰岛素分泌检测实验

INS-1细胞中GSIS检测

上图. 将INS-1大鼠胰岛瘤细胞以100μl体积铺到96孔板中。37°C孵育3天后，将细胞培养基用100μl含葡萄糖的GSIS缓冲液置换，按规定浓度孵育。每个葡萄糖浓度都包含复孔。GSIS样品在37°条件下孵育1小时后采集样品，在384孔板上每次取10μl 使用Lumit® Insulin Immunoassays重复测定胰岛素含量。

人胰岛微组织GSIS检测

上图. 使用96孔板每孔放置一个胰岛微组织。用50μl 1.67 mM葡萄糖孵育3组6个胰岛微组织，检测其基本的胰岛素分泌水平。每组再用50μl 1.67 mM、6.7mM或16.7mM葡萄糖在37℃下孵育1小时。采集10μl GSIS样品进行Lumit ®Insulin Immunoassays 免疫检测。3D Insight™人胰岛微组织由瑞士InSphero AG公司提供。

兼容小型化和半自动化配药

Lumit®免疫分析方法易于小型化和自动化分析，可快速测量大量的样品：

胰岛素免疫分析方法在两种384孔板中进行;
常规容量(RV)20μl样品和低容量(LV)6μl样品；
为了加快抗体(20或6μl)和NanoLuc® Reagents(10或3μl)的溶液分配，使用了3种半自动化分液器；
Multidrop™ Combi nL(ThermoFisher)：nL至μL加压分液；
台式移液器，96通道(Sorenson)：吸头分液；
Mantis®液体处理器(Formulatrix®)：正置换芯片分液；

上图. 用PBS + 0.1% BSA制备稀释的胰岛素，并使用Tecan Evo MCA 96吸头机械臂抽吸到多个384孔常规体积和低体积板中。每种胰岛素浓度在每板16个孔中进行测定。平均RLU用于计算信背比(Signal-to-Background)、信噪比(Signal-to-Noise)和Zʹ值。Zʹ因子是一个用来表示HTS测定质量的参数，其值>为0.5表示该测定方法是可接受的。误差棒是+/- 1 s.d.，除非另有说明。

产品订购信息

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可扩展到384孔板。

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普洛麦格公司（Promega Corporation）是为生命科学行业提供创新解决方案和技术支持的领先者。公司拥有超过4,000种产品的产品组合，服务于细胞生物学、DNA、RNA及蛋白质分析、药物研发、人类身份鉴定、分子诊断等生命科学领域。过去45年间，这些工具与技术的应用范围持续扩展，目前被全球科研机构、法医部门、制药企业、临床诊断实验室，以及兽医、农业和环境检测领域的专业人员使用。普洛麦格总部位于美国威斯康星州麦迪逊市，在16个国家设有分支机构，并通过50余家全球经销商提供服务。更多信息请访问：www.promega.com。