
AFFINIBODY
BCA蛋白浓度
测定试剂盒




货号:AFBCA-500T
价格:208元/套
BCA蛋白浓度测定试剂盒基于目前国际通用的BCA( bicinchoninic acid)蛋白浓度检测方法研制而成,可实现蛋白浓度的简便、快速测定,兼具高稳定性、高灵敏度与高兼容性,适配多场景实验需求。
(购买请联系客服或代理)


灵敏度更高
相较于普通BCA试剂盒,本产品检测性能更优,检测浓度下限低至20μg/ml,最小检测蛋白量仅0.2μg,待测样品体积适配范围为1-20μl,适配微量样品检测。
显色速度更快
线性关系优良
在20-2000μg/ml浓度范围内,蛋白浓度与吸光度呈现良好线性关系,检测结果准确可靠;本产品0.025-0.5mg/ml浓度区间的标准曲线参考下图。

(点击图片可放大)
本产品配套的蛋白标准品(BSA)已提前稀释至1.0mg/ml、0.5mg/ml、0.4mg/ml、0.3mg/ml、0.2mg/ml、0.1mg/ml,可直接用于实验。
若实验需更低浓度的标准品,可使用1.0mg/ml的标准品,加入纯水进行梯度稀释,稀释后需充分混匀。
BCA工作液的配制
根据待检测样品的数量,按BCA试剂A:BCA试剂B=50:1(体积比)的比例,配制适量BCA工作液,配制后需充分颠倒混匀。
示例:取5ml BCA试剂A,加入100μl BCA试剂B,充分混匀后,即可得到5.1ml BCA工作液。
注:BCA工作液配制后,在室温条件下可稳定保存24小时,建议现配现用,避免长时间放置影响检测效果。
蛋白浓度检测
取96孔板,将稀释好的标准品(浓度分别为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml),每孔加入20μl,做好孔位标记。
向96孔板的每个样品孔、标准品孔中,分别加入200μl配制好的BCA工作液,轻轻震荡混匀后,置于25℃环境中孵育20-30分钟。
注:也可将96孔板置于37℃环境中孵育30分钟;BCA法显色具有温度和时间依赖性,颜色会随孵育时间延长而加深,且温度升高会加快显色反应速度。若样品蛋白浓度较低,可适当提高孵育温度或延长孵育时间,以确保显色效果。
孵育完成后,使用酶标仪测定各孔在562nm波长下的吸光度(也可选择540-595nm之间的任意波长进行测定)。
根据标准品绘制的标准曲线,结合实验中使用的样品的A值和稀释倍数,计算出样本的实际蛋白浓度。
注意事项
1、本试剂盒检测效果受螯合剂和高浓度还原剂影响,实验前需确保样品中EDTA浓度低于10mM,无EGTA,无二硫苏糖醇(DTT),β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)浓度低于0.01%;若样品不符合上述条件(不适用BCA法),建议联系亲和生命客服,咨询升级款BCA试剂盒以优化检测效果。
2、本产品对样品中各类物质的详细兼容性,与普通BCA蛋白浓度测定试剂盒一致;每盒试剂盒可完成500个样品的检测,性价比突出。


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